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電穿孔電融合

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細胞電轉緩沖液A
産品貨號:CPB011
品牌:啓文生物/Qivon
産品說明:該電轉緩沖液采用獨特配方,可以應用于人類T細胞的電轉染實驗。該産品可以減少電轉過程中對T細胞的殺傷,同時電轉後T細胞活力恢複更快。

一、使用效果


1、本電轉緩沖液可以用于mRNA的電轉

     实例:静息状态的人T細胞在電轉GFP mRNA 24小时后, 使用荧光显微镜下观察,T細胞呈現綠色。

2、本電轉緩沖液可以用于電轉CRISPRCas9T細胞基因編輯。

     实例:使用CRISPRCas9敲除T細胞TCR分離T細胞后使用Dynabeads激活。激活三天後,使用混有CRISPRCas9组份的電轉缓冲液进行电转。电转完成后对T細胞进行培养。在激活第九天使用流式細胞术对基因编辑效率进行验证


T細胞在激活第九天進行CD3染色,TCR敲除的T細胞CD3不能到达細胞膜,因此細胞染色为阴性。右图显示TCR敲除效率約爲70%



二、電轉操作流程:

1.T細胞计数;
2.取一定数量的T細胞,离心收集(1500rpm,5min);
3.离心后弃上清,使用T細胞电转缓冲液(4摄氏度)重悬細胞;
4.離心(1500rpm,5min);
5.同樣步驟再重複步驟3-4兩次;
6.清洗完成后,使用100uL-200uL电转缓冲液重悬細胞;
7.設定電轉參數;
8.将細胞悬液转移到電極杯杯内;
9.将電極杯放入电转槽;
10.啓動電轉;
11.电转完成后尽快将細胞转移到T細胞培养基中;
12.細胞培养。



三、産品規格:

貨號

産品介紹

CPB011

電穿孔緩沖液,用于T細胞,100ml


四、使用範圍:

本産品只能用于科研,不能用于臨床。


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1. 2 - 82年;

2. 每次使用均需要無菌操作,避免交叉汙染。



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