試劑盒在室溫(15-25 ℃) 干燥条件下保存一年。
産品說明:
本試劑盒采用異硫氰酸胍法溶膠,利用矽膠膜離心柱特異地吸附DNA,可从 TAE 或 TBE 琼脂糖凝胶中高效地回收纯化 DNA 片段,操作简单、快速,纯化后得到的产物可直接用于酶切、连接、转化、测序等多种实验。
試劑盒組成:
Component |
GE50 |
GE200 |
Buffer QG |
30 mL |
120 mL |
Wash buffer |
10 mL |
40 mL |
Elution Buffer |
5 mL |
10 mL |
Collection Tubes |
50 个 |
200 个 |
注:使用前加入推薦體積的無水乙醇至Wash buffer中, 所有離心均在室溫下進行。
操作步驟:
1、切割琼脂糖凝胶中的目的 DNA 条带,放入干净的离心管中称重,如凝胶重 100 mg,可视为 100 μL(100 mg≈100 μL),以此类推。
2、加入3倍体积 Buffer QG,于55 ℃水浴中溶胶6-102-3分钟)混合,确保胶块完全融化,当胶完全融化后,观察溶液的颜色,如颜色为紫色,则需加入3 M(pH 5.2)的醋酸钠溶液,调整颜色至 Buffer PB相近。(为增加DNA的回收量,可加入1倍体积的异丙醇于已融化的凝胶溶液中,例如凝胶重100 mg,则加入100 μL 的异丙醇)。
3、待融化的凝膠溶液溫度降至室溫後,加入收集柱中靜置1分鍾,10000 rpm 离心1分鍾,弃流出液。
4、加入650 μL Wash buffer,10000 rpm 离心1分鍾,弃流出液。
5、10000 rpm 离心1-2分钟,彻底去除残留的 Wash buffer。
6、將收集柱置于一幹淨的離心管中,開蓋靜置1分鍾,在柱的中央膜上加入30-50 μL 的 Elution Buffer 或 ddH2O,室温静置1分钟。为提高纯化产量,可选择 60 ℃-70 ℃预热的 Elution Buffer 或 ddH2O ,青柠影院免费观看电视剧高清西瓜-20℃保存。
注意事項:
-爲了保證回收效果,電泳時請使用新鮮的電泳緩沖液。
-割膠時,膠塊盡量小;溶膠時,確保膠塊完全融化。
-紫外照射会对 DNA 造成损伤,影响下游的实验(如克隆、连接),尽量缩短紫外照射时间。